قسمتی از متن:
تکنیک رییل تایم در واقع نقطه
برخورد ابداعات جدید در زمینه ترموسایکلر ، انواع تغییرات در پرایمرها و مخلوط
کردن روشهای هیبریدیزاسیون با تکنیکهای آمپلیفکاسیون می باشد و در واقع نسل جدیدی
از ترموسایکلرها با سیستم فلورومتری این اواخر ارائه شده که اجاره مونیتور کردن
پیوسته خاصیت فلوئورسانس محصول PCR در زمان جمع شدن را می دهد . در این سیستم ها از کاوشگرها یا
پروپهای هیبریدیزاسیون مارک دار شده با رنگهای فلوئورسانس در انتهای 5 یا 3
استفاده می شود که امکان مونیتورینگ پیوسته محصول PCR را بدون
جداسازی آنها در روشهائی همچون الکتروفورز در ژل آگاروز با ژل پلی آکریل آمید , می
دهد .افزایش سیستم های رییل تایم مربوط می شود به :
کاهش زمان سیکل های PCR
حذف مرحله Post – PCR
کاربرد مارک های فلوروژنیک و روش
های حساس آشکارسازی تابش آن ها
از معایب سیستم های رییل تایم نسبت
به روشهای متواثر PCR می توان اشاره نمود به :
عدم توانایی در مشخص کردن اندازه
محصول بدون باز کردن سیستم
ناسازگار بودن برخی پلات فورمها با
شیمی برخی رنگ های فلوروژنیک
بطور نسبی توانایی محدود کاربرد
روش مالتیپلکس .
در روشهای رییل تایم نیازی به
دستکاری بعد از مرحله تکثیر آمپلیکون نمی باشد . بنابراین ، این روشهای سنجش تحت
عنوان روشهای بسته یا سیستم های هووموژن مشهور گردیده اند . از مزایای سیستم های
هوموژن به حداقل رسیدن آلودگی به عنوان آفت اصلی روشهای تکثیری و توانایی انجام
دقیق سنجش می باشد .
فهرست مطالب:
مقدمه
تاریخچه
کلیات
روشهای سنتی PCR
تکتیک رییل تایم
ریزآرایه ی DNA و تراشه زنی
اصول آزمون
بیشینه تحقیق
منابع